食醋作為歷史悠久且廣泛應(yīng)用的調(diào)味品,不僅極大地豐富了食物的口感體驗(yàn),還對(duì)人體健康展現(xiàn)出多方面的益處。對(duì)于食醋感官品質(zhì),其風(fēng)味特征占據(jù)了核心地位,包括香氣和滋味兩個(gè)方面。食醋的香氣主要來源于一系列揮發(fā)性化合物,如酸類、醛類、酯類、酮類和酚類等,這些化合物共同構(gòu)成了食醋獨(dú)特的香氣輪廓;而食醋的滋味主要由有機(jī)酸和游離氨基酸等非揮發(fā)性成分構(gòu)成,它們?yōu)槭炒滋峁┝缩r明的味覺體驗(yàn)。這些風(fēng)味成分的復(fù)雜相互作用,決定了食醋的整體感官品質(zhì)。
在食醋的多種釀造體系中,傳統(tǒng)固態(tài)釀造與封閉式固態(tài)釀造體系因工藝上的差異,導(dǎo)致最終產(chǎn)品的風(fēng)味品質(zhì)各具特色。傳統(tǒng)固態(tài)食醋釀造體系作為一種歷史悠久的釀造方法,其風(fēng)味形成依賴自然微生物群落及環(huán)境條件的綜合作用,形成了復(fù)雜而獨(dú)特的風(fēng)味。然而,在夏季對(duì)食醋進(jìn)行取樣發(fā)現(xiàn),夏季醅內(nèi)外的溫度和濕度等環(huán)境因素的波動(dòng)可能會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵過程中某些微生物的生長(zhǎng),這些微生物在代謝過程中可能產(chǎn)生了不同的風(fēng)味物質(zhì),從而引起食醋風(fēng)味物質(zhì)的不穩(wěn)定性和風(fēng)味品質(zhì)的波動(dòng)。因此,夏季的環(huán)境變化可能會(huì)對(duì)食醋的風(fēng)味品質(zhì)產(chǎn)生顯著影響,需要在生產(chǎn)過程中對(duì)這些因素進(jìn)行精細(xì)控制,以確保食醋的風(fēng)味穩(wěn)定性和品質(zhì)一致性。相比之下,封閉式固態(tài)釀造體系則借助現(xiàn)代發(fā)酵設(shè)備與技術(shù)的革新,實(shí)現(xiàn)了對(duì)發(fā)酵環(huán)境的高度可控化、智能化管理,有效阻止了外界物質(zhì)的干擾,確保了罐體內(nèi)適宜的溫度、濕度條件,提高了物料分布的均勻性,從而實(shí)現(xiàn)了發(fā)酵產(chǎn)物的精準(zhǔn)提取與風(fēng)味品質(zhì)的穩(wěn)定控制。這一釀造方式不僅提升了食醋的生產(chǎn)效率,更在風(fēng)味品質(zhì)上展現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。
江蘇科技大學(xué)糧食學(xué)院的李思雨、余永建*、 李滬強(qiáng) 等人為深入探討這些差異,通過頂空固相微萃取(HS-SPME)和氣相色譜-質(zhì)譜(GCMS)聯(lián)合應(yīng)用,可以對(duì)食醋中的揮發(fā)性成分進(jìn)行詳細(xì)的解析,并且通過結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法,進(jìn)一步闡釋這些揮發(fā)性成分的復(fù)雜性,為深入理解食醋的風(fēng)味特征提供科學(xué)依據(jù)。然而,盡管封閉式固態(tài)釀造體系在控制發(fā)酵條件、提高生產(chǎn)效率方面具有優(yōu)勢(shì),但其是否能夠完全替代傳統(tǒng)固態(tài)釀造體系,在風(fēng)味品質(zhì)上達(dá)到或超越后者,尚需進(jìn)一步探討。因此,通過液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)結(jié)合GC-MS,深入研究這兩種釀造體系在發(fā)酵過程中風(fēng)味品質(zhì)的演變規(guī)律及差異,對(duì)于提升食醋產(chǎn)品質(zhì)量、優(yōu)化釀造工藝、滿足消費(fèi)者多元化需求具有重要意義。
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1 醅內(nèi)外環(huán)境因子的變化以及差異性分析
由圖1可知,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),封閉式固態(tài)發(fā)酵的溫度從(31.00±0.53)℃開始逐漸上升,到第12天達(dá)到最高點(diǎn)((43.90±1.18)℃),然后在第14天略微下降至(41.50±0.72)℃。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的溫度從(30.67±0.58)℃開始波動(dòng)上升,在第14天達(dá)到(44.67±0.58)℃的峰值,然后在第16天降至(39.00±1.00)℃,最后在第18天回升到(40.67±0.58)℃。由此可知,封閉式固態(tài)發(fā)酵的溫度上升較為平穩(wěn),沒有太多波動(dòng),而傳統(tǒng)發(fā)酵溫度波動(dòng)較大,并且最高溫度略高于封閉式發(fā)酵。且封閉式固態(tài)發(fā)酵體系的溫度上升較為穩(wěn)定,同時(shí)溫度控制更為平穩(wěn),對(duì)發(fā)酵過程更有利。
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隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),封閉式發(fā)酵的還原糖質(zhì)量濃度從(2.08±0.04)g/100 mL逐漸下降至(1.22±0.02)g/100 mL(第4天),隨后略有波動(dòng),到第10天又回升至(2.22±0.04)g/100 mL,并在第14天達(dá)到(2.64±0.05)g/100 mL。傳統(tǒng)發(fā)酵的還原糖質(zhì)量濃度從(2.01±0.02)g/100 mL開始,逐漸下降至第8天的(1.06±0.06)g/100 mL,之后逐步回升,到第18天達(dá)到(2.93±0.04)g/100 mL。封閉式發(fā)酵的還原糖含量前期消耗較快,可能是因?yàn)榍捌谶€存在酵母菌的活動(dòng)(即便其活動(dòng)能力處于較低水平),繼續(xù)將殘留的還原糖轉(zhuǎn)化為乙醇。一些醋酸菌也具有一定的糖代謝能力,可以直接利用還原糖作為能量來源,尤其是在乙醇不足時(shí),這會(huì)導(dǎo)致還原糖減少。而在后期還原糖略有回升,可能是由酶解作用增強(qiáng)、原料溶解、菌體自溶釋放導(dǎo)致的。相比之下,傳統(tǒng)發(fā)酵的還原糖消耗較平緩,且在發(fā)酵周期結(jié)束時(shí)最終恢復(fù)的還原糖含量略高于封閉式發(fā)酵,對(duì)成品的風(fēng)味產(chǎn)生不同影響。
隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),封閉式固態(tài)發(fā)酵的pH值從5.51±0.01到第14天降至3.80±0.01。同時(shí),總酸質(zhì)量濃度從(0.60±0.01)g/100 mL逐漸上升至在第14天的最高值((7.20±0.10)g/100 mL)。不揮發(fā)酸質(zhì)量濃度從(0.76±0.02)g/100 mL逐漸增加至第14天的最高值((2.21±0.08)g/100 mL)。而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的pH值從5.68±0.01逐漸下降至第18天時(shí)達(dá)到最低值(3.91±0.02)。其總酸質(zhì)量濃度從(0.34±0.05)g/100 mL開始逐步增加,并在第18天達(dá)到峰值((7.58±0.10)g/100 mL)。不揮發(fā)酸質(zhì)量濃度從(0.65±0.70)g/100 mL開始緩慢增加,到第18天達(dá)到(1.96±0.01)g/100 mL。
綜上所述,封閉式發(fā)酵的pH值下降更快,第14天已降至最低值(3.80±0.01),而傳統(tǒng)發(fā)酵在第18天才達(dá)到接近的低pH值。封閉式發(fā)酵的酸化速度明顯更快。封閉式發(fā)酵的不揮發(fā)酸生成速率較快,第14天達(dá)到高峰值((2.21±0.08)g/100 mL),而傳統(tǒng)發(fā)酵到第18天時(shí)僅達(dá)到(1.96±0.01)g/100 mL,這表明封閉式發(fā)酵在較短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生了更多的不揮發(fā)酸,產(chǎn)生該差異的原因可能是微生物代謝環(huán)境和氧氣供應(yīng)的不同。封閉式發(fā)酵通過設(shè)備優(yōu)化精準(zhǔn)控制溫濕度,減少外界影響,使微生物代謝更穩(wěn)定,酸性物質(zhì)生成快,pH值迅速下降,且封閉發(fā)酵氧氣分布不均勻,部分區(qū)域?yàn)榈脱醐h(huán)境,乳酸菌生長(zhǎng)活躍,不揮發(fā)酸(以乳酸計(jì))含量迅速增加。傳統(tǒng)發(fā)酵受環(huán)境因素影響較大,溫度波動(dòng)顯著,微生物代謝環(huán)境不穩(wěn)定,酸性物質(zhì)生成慢,pH值下降較慢,且氧氣充足,醋酸菌代謝強(qiáng),總酸(揮發(fā)性酸)含量增加較慢,不揮發(fā)酸(以乳酸計(jì))生成相對(duì)較少。同時(shí),總酸和不揮發(fā)酸的含量變化趨勢(shì)也印證了pH值的變化趨勢(shì)。由此可見,封閉式發(fā)酵在酸化速度和不揮發(fā)酸生成方面表現(xiàn)出更高的效率,這可能使得封閉式發(fā)酵產(chǎn)出的食醋在風(fēng)味上具有更強(qiáng)的酸味。
2 總酚和總黃酮的含量變化以及差異性分析
食醋中的總酚和總黃酮主要來源于原料(如糯米、麩皮等)中酚類前體物質(zhì)的轉(zhuǎn)化,在發(fā)酵過程中,前體物質(zhì)會(huì)被微生物酶系轉(zhuǎn)化,生成活性酚類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)。其次,微生物(如酵母菌、醋酸菌等)的次級(jí)代謝產(chǎn)物中也含有大量的生物活性物質(zhì)。總酚和總黃酮具有顯著的生理功能和健康益處。這些活性成分賦予食醋重要的功能特性,尤其是在抗氧化、抗炎、降血糖、心血管保護(hù)和抗菌等方面具有明顯的作用。
由圖2可知,封閉式固態(tài)發(fā)酵的初始總酚質(zhì)量濃度為(0.07±0.01)g/100 mL,在發(fā)酵過程中,總酚含量緩慢增加,最后在第14天時(shí)達(dá)到(0.10±0.01)g/100 mL。從第0天到第14天,總酚含量總體呈現(xiàn)平緩的上升趨勢(shì)。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的初始總酚質(zhì)量濃度為(0.09±0.01)g/100 mL,在發(fā)酵的前8 d中,總酚含量逐漸增加,但在第12天后出現(xiàn)波動(dòng)。在第10天,總酚質(zhì)量濃度達(dá)到了(0.11±0.01)g/100 mL,然后下降至(0.09±0.01)g/100 mL(第12天),再到(0.12±0.01)g/100 mL(第14天),最后在第18天達(dá)到最大值((0.13±0.01)g/100 mL)。整體來看,傳統(tǒng)發(fā)酵組的總酚含量在前期穩(wěn)步增加,之后波動(dòng)。
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隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),封閉式固態(tài)發(fā)酵的pH值從5.51±0.01到第14天降至3.80±0.01。同時(shí),總酸質(zhì)量濃度從(0.60±0.01)g/100 mL逐漸上升至在第14天的最高值((7.20±0.10)g/100 mL)。不揮發(fā)酸質(zhì)量濃度從(0.76±0.02)g/100 mL逐漸增加至第14天的最高值((2.21±0.08)g/100 mL)。而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的pH值從5.68±0.01逐漸下降至第18天時(shí)達(dá)到最低值(3.91±0.02)。其總酸質(zhì)量濃度從(0.34±0.05)g/100 mL開始逐步增加,并在第18天達(dá)到峰值((7.58±0.10)g/100 mL)。不揮發(fā)酸質(zhì)量濃度從(0.65±0.70)g/100 mL開始緩慢增加,到第18天達(dá)到(1.96±0.01)g/100 mL。
封閉式固態(tài)發(fā)酵的初始總黃酮質(zhì)量濃度為(0.16±0.01)g/100 mL,發(fā)酵過程中總黃酮質(zhì)量濃度在前期(2~4 d)快速增長(zhǎng),在第4天達(dá)到較高峰值((0.40±0.01)g/100 mL)。隨后,總黃酮質(zhì)量濃度有所回落,但在第8天又上升至(0.82±0.04)g/100 mL。第10天之后,總黃酮質(zhì)量濃度出現(xiàn)波動(dòng),最后在第14天降至(0.29±0.01)g/100 mL。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的初始總黃酮質(zhì)量濃度為(0.17±0.01)g/100 mL,發(fā)酵過程中總黃酮質(zhì)量濃度在前期逐漸增加,到第10天時(shí)達(dá)到峰值((0.98±0.01)g/100 mL)。隨后,總黃酮質(zhì)量濃度在第12天開始回落,到第14天時(shí)為(0.35±0.01)g/100 mL。整體上,總黃酮含量呈現(xiàn)較大的波動(dòng)。
綜上所述,封閉式和傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的總酚和總黃酮含量在變化趨勢(shì)上存在差異。封閉式發(fā)酵產(chǎn)生的總酚和總黃酮低于傳統(tǒng)發(fā)酵且波動(dòng)較大,而傳統(tǒng)發(fā)酵則表現(xiàn)為更穩(wěn)定的上升趨勢(shì),尤其是總黃酮含量的上升較為平穩(wěn),雖然有一定波動(dòng),但峰值更為明顯。導(dǎo)致以上差異的原因可能是氧氣的參與程度不同和微生物群落差異,傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵更易與氧氣接觸,微生物種類豐富,代謝酶系統(tǒng)復(fù)雜,促進(jìn)了酚類和黃酮類的氧化生成及代謝轉(zhuǎn)化;封閉式固態(tài)發(fā)酵因氧氣分布不均勻,部分區(qū)域?yàn)榈脱醐h(huán)境,發(fā)酵菌群?jiǎn)我唬x能力有限,酚類和黃酮類的生成速度較慢但降解相對(duì)較少。在工藝控制特點(diǎn)方面,封閉式固態(tài)發(fā)酵強(qiáng)調(diào)環(huán)境的穩(wěn)定性,適合平緩生成抗氧化物質(zhì);傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵受外部環(huán)境影響大,但更有利于總酚和黃酮類物質(zhì)的多樣性及動(dòng)態(tài)積累。盡管兩種發(fā)酵體系的總酚和總黃酮在變化趨勢(shì)上存在差異,但其總酚和總黃酮的含量在發(fā)酵過程中均顯著增加(
P<0.05),該結(jié)果也與前人研究的鎮(zhèn)江香醋發(fā)酵過程中黃酮類化合物顯著增加的結(jié)果一致。
3 有機(jī)酸含量的變化以及差異性分析
如圖3所示,在鎮(zhèn)江香醋發(fā)酵過程中共檢測(cè)出9 種有機(jī)酸,分別是乙酸、乳酸、焦谷氨酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、丙酮酸、蘋果酸和檸檬酸,且隨著發(fā)酵進(jìn)行,有機(jī)酸含量呈上升趨勢(shì)。其中,乳酸、乙酸和琥珀酸是醋酸發(fā)酵過程中相對(duì)含量較多的有機(jī)酸。同時(shí),對(duì)不同體系醋酸發(fā)酵過程中的9 種有機(jī)酸進(jìn)行了差異分析,結(jié)果如圖4所示。
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在封閉和傳統(tǒng)發(fā)酵過程中,從累積速度方面進(jìn)行對(duì)比,封閉式固態(tài)發(fā)酵的草酸、酒石酸等有機(jī)酸在初期(前4 d)迅速積累,速度明顯快于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵,而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵中酸的增加較為平緩。但封閉式固態(tài)發(fā)酵中的乳酸快速積累,酸性環(huán)境較早形成,抑制了其他菌種的活性,從而阻礙多種酸類的持續(xù)生成,而傳統(tǒng)發(fā)酵中pH值下降較慢,使得菌種生成更加多樣。封閉式固態(tài)發(fā)酵中乳酸的含量峰值(3.36 g/100 mL)顯著高于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵(1.79 g/100 mL),但傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的乙酸含量略高于封閉式固態(tài)發(fā)酵,檸檬酸和琥珀酸的變化相對(duì)平穩(wěn)。導(dǎo)致以上差異的原因可能是微生物代謝環(huán)境不同,封閉式固態(tài)發(fā)酵的氧氣分布不均勻,部分區(qū)域?yàn)榈脱醐h(huán)境,厭氧菌(如乳酸菌)活躍,導(dǎo)致乳酸大量生成;而傳統(tǒng)發(fā)酵中氧氣充足,醋酸菌代謝更強(qiáng),促進(jìn)乙酸和其他中間產(chǎn)物的累積。在發(fā)酵后期,封閉式固態(tài)發(fā)酵(12~14 d)的乳酸和焦谷氨酸大量積累,而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵中乙酸和琥珀酸的積累更為顯著(
P<0.05),且菌種分布更加均衡。造成以上差異的原因可能是三羧酸循環(huán)過程和脫氫酶系統(tǒng)的差異,傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵中氧氣充足使三羧酸循環(huán)較完整,推動(dòng)蘋果酸、琥珀酸等進(jìn)一步轉(zhuǎn)化。同時(shí),醋酸菌分泌的乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶能將乙醇氧化成乙酸。而封閉發(fā)酵中三羧酸循環(huán)部分受阻,導(dǎo)致中間代謝物的積累。由此可知,封閉式固態(tài)發(fā)酵更適合生成高乳酸含量的酸性產(chǎn)品,傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵則具有更復(fù)雜的風(fēng)味平衡,可根據(jù)消費(fèi)者需求調(diào)整工藝,優(yōu)化目標(biāo)產(chǎn)物分布。
食醋中的有機(jī)酸按照揮發(fā)性可以分為揮發(fā)酸和不揮發(fā)酸。其中揮發(fā)酸為乙酸,不揮發(fā)酸有乳酸、琥珀酸、蘋果酸、焦谷氨酸等8 種酸。不揮發(fā)酸含量越高,食醋的整體口感就會(huì)更加柔和綿延,更易為消費(fèi)者接受。通過統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),發(fā)酵結(jié)束時(shí),封閉式固態(tài)食醋不揮發(fā)酸占比為51.9%,傳統(tǒng)固態(tài)食醋不揮發(fā)酸占比為32.8%,由此可知,封閉式固態(tài)食醋最終的整體口感綿延度優(yōu)于傳統(tǒng)固態(tài)食醋。且封閉式固態(tài)發(fā)酵食醋中較高的有機(jī)酸(檸檬酸、乳酸等)含量在提高食醋營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的同時(shí),還可減輕食醋尖銳刺激性的酸味道,很好的調(diào)節(jié)食醋的口感,令其口味更加豐富和協(xié)調(diào),還可增加食醋風(fēng)味的復(fù)雜性和水果香氣。
4 游離氨基酸含量的變化以及差異性分析
食醋中的游離氨基酸主要來源于原料(如麩皮、大糠等)以及微生物分泌的外源性酶(如谷氨酰胺酶)對(duì)蛋白質(zhì)的分解。此外,微生物(如醋酸菌、乳酸菌、酵母菌)通過代謝蛋白質(zhì)也可以生成游離氨基酸。游離氨基酸對(duì)食醋的風(fēng)味和口感有著主要的貢獻(xiàn),它們可以通過美拉德等反應(yīng)生成多種香氣和風(fēng)味化合物,還能通過轉(zhuǎn)氨作用轉(zhuǎn)化成其他揮發(fā)性化合物(如酯類、醇類)。食醋中也含有大量呈味氨基酸,如具有鮮味的天冬氨酸、谷氨酸,具有甜味的蘇氨酸、甘氨酸,以及具有苦味的賴氨酸、酪氨酸等氨基酸,不同的呈味氨基酸相互影響,可使食醋的口感更加豐富。
在不同發(fā)酵時(shí)期的18 個(gè)樣品中共檢測(cè)出19 種游離氨基酸,發(fā)酵過程中對(duì)食醋風(fēng)味影響較大且含量較多的15 種氨基酸如圖5所示,這些游離氨基酸的含量整體呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),且在發(fā)酵后期游離氨基酸的種類和數(shù)量相對(duì)豐富。同時(shí),對(duì)不同體系醋酸發(fā)酵過程中的主要游離氨基酸進(jìn)行了差異分析,結(jié)果如圖6所示。
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兩種發(fā)酵體系的氨基酸在變化趨勢(shì)和含量峰值上存在顯著差異(
P<0.05),從而直接影響了食醋的風(fēng)味特征。封閉式固態(tài)發(fā)酵中色氨酸的含量在第4天便達(dá)到了峰值(156.5 g/100 mL),而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的色氨酸在16~18 d時(shí)才達(dá)到封閉式固態(tài)發(fā)酵的峰值,由此可見,封閉式固態(tài)發(fā)酵中色氨酸的生成速率顯著高于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵。色氨酸有利于在發(fā)酵過程中穩(wěn)定乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的活性,且色氨酸參與了泛素的合成,這是醋酸菌乙醇呼吸鏈中唯一的自由電子轉(zhuǎn)運(yùn)體,色氨酸可能會(huì)加強(qiáng)乙醇呼吸鏈中的電子轉(zhuǎn)運(yùn),從而促進(jìn)ATP的合成,使得封閉發(fā)酵的酸化速度快于傳統(tǒng)發(fā)酵,導(dǎo)致最終的酸度增加。同時(shí),色氨酸作為必需氨基酸,對(duì)人體生命健康也具有重要作用,能夠合成神經(jīng)遞質(zhì)(血清素)以及促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和修復(fù),色氨酸含量的變化趨勢(shì)也印證了pH值的變化趨勢(shì)。封閉式固態(tài)發(fā)酵食醋中谷氨酸和天冬氨酸等鮮味氨基酸的含量迅速增長(zhǎng),谷氨酸在發(fā)酵第6天達(dá)到峰值(3 g/100 mL),天冬氨酸在發(fā)酵第4天達(dá)到峰值(27 g/100 mL),其中鮮味氨基酸的累積速率明顯高于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的累積速率。雖然傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵中氨基酸的積累速度較慢,但后期變化較穩(wěn)定。賴氨酸和酪氨酸的含量在發(fā)酵后期(12~18 d)持續(xù)增加,賦予產(chǎn)品更多復(fù)雜的風(fēng)味。通過統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),發(fā)酵結(jié)束時(shí),封閉式固態(tài)發(fā)酵體系中的苦味氨基酸占比為15.99%,傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵苦味氨基酸占比為30.8%。以上差異主要源于封閉式固態(tài)發(fā)酵可以嚴(yán)格控制溫度、濕度和氧氣供應(yīng)等因素,從而減少雜菌的滋生和氧化作用。這種環(huán)境有利于特定發(fā)酵菌群穩(wěn)定發(fā)揮作用,迅速生成鮮味氨基酸且抑制苦味氨基酸的過度累積。因此,封閉發(fā)酵的風(fēng)味更加單一但鮮明,有助于提高產(chǎn)品的“鮮味”口感。而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵過程中,由于開放環(huán)境中的微生物種類繁多,不同菌群的協(xié)同作用復(fù)雜,易產(chǎn)生豐富的苦味氨基酸。這種多樣的微生物環(huán)境雖然帶來了較強(qiáng)的醇厚風(fēng)味和層次感,但也增加了苦味成分的比例。此外,傳統(tǒng)發(fā)酵往往時(shí)間較長(zhǎng),導(dǎo)致氨基酸經(jīng)歷進(jìn)一步分解或參與苦味氨基酸生成的側(cè)反應(yīng)。因此,傳統(tǒng)發(fā)酵風(fēng)味更復(fù)雜,但苦味較明顯。醋酸發(fā)酵階段游離氨基酸的積累不僅改善了醋的風(fēng)味,促進(jìn)醋中風(fēng)味物質(zhì)的形成,使得醋的風(fēng)味口感更加協(xié)調(diào),從而提高食醋的品質(zhì)。游離氨基酸除了對(duì)食醋的風(fēng)味和口感有著主要的貢獻(xiàn)作用以外,還是食醋中的一類健康因子,對(duì)人體生命健康有益。谷物醋中主要的氨基酸為谷氨酸和天冬氨酸,在醋中扮演著重要的角色,具有調(diào)節(jié)血糖、抗氧化、促進(jìn)消化和改善肌肉功能等多種健康益處。封閉式固態(tài)發(fā)酵食醋中谷氨酸和天冬氨酸等鮮味氨基酸的含量在發(fā)酵前期迅速增長(zhǎng),其中,谷氨酸可以促進(jìn)葡萄糖代謝,有助于調(diào)節(jié)血糖水平,對(duì)糖尿病患者有益;還可以清除體內(nèi)自由基,延緩衰老;以及刺激胃酸分泌,從而促進(jìn)食物消化,緩解消化不良癥狀;谷氨酸、天冬氨酸和蘇氨酸等氨基酸還能參與蛋白質(zhì)合成,有助于肌肉生長(zhǎng)和修復(fù)。
5 揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量的變化以及差異性分析
為研究發(fā)酵過程中的香氣特征,利用HS-SPME和GC-MS結(jié)合分析,對(duì)封閉式固態(tài)發(fā)酵和傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵兩種不同發(fā)酵樣品的香氣物質(zhì)進(jìn)行分析和鑒定,其中醇類、醛類、酸類和酯類是鎮(zhèn)江香醋的主要香氣成分。由圖7可知,在封閉式固態(tài)發(fā)酵體系中檢測(cè)出的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)包含醇類11 種、酸類6 種、酯類19 種、醛類6 種。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系中檢測(cè)出的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)包含醇類8 種、酸類7 種、酯類15 種、醛類4 種。由此可見,封閉式固態(tài)發(fā)酵的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)顯著多于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵。醇類是鎮(zhèn)江香醋中的重要香氣成分之一,它們主要來源于酒醪中的乙醇,以及發(fā)酵過程中產(chǎn)生的其他醇類物質(zhì)。同時(shí),醇類與有機(jī)酸在微生物酯化酶的作用下通過酯化反應(yīng),可以生成具有不同芳香味的酯類,共同構(gòu)成了鎮(zhèn)江香醋復(fù)雜的香氣。食醋中酯類化合物的增加,還可以調(diào)節(jié)酸味并抑制醋中的刺激性氣味。醛類和酮類也是鎮(zhèn)江香醋中的香氣成分之一,它們主要來源于發(fā)酵過程中的微生物代謝和氧化反應(yīng)。鎮(zhèn)江香醋中也有一定含量的酚類物質(zhì),它們主要來源于原料中木質(zhì)素等成分的降解。其具有獨(dú)特的香氣和口感,對(duì)鎮(zhèn)江香醋的整體風(fēng)味有一定影響。
隨著發(fā)酵的進(jìn)行,揮發(fā)性化合物的種類和含量整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。封閉式固態(tài)發(fā)酵的乙酸乙酯在高峰后(2 699.33 μg/100 mL)迅速消失,顯示出其較為短暫的積累期。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵則保持了較長(zhǎng)時(shí)間的乙酸乙酯積累,并在后期出現(xiàn)緩慢衰減。乙酸作為食醋的主體酸味物質(zhì),在醋酸發(fā)酵階段顯著增加,累積趨勢(shì)也與其相同。封閉式固態(tài)發(fā)酵中乙酸異戊酯的含量明顯波動(dòng),集中在早期的高峰期,而傳統(tǒng)發(fā)酵保持較長(zhǎng)時(shí)間的較高濃度,體現(xiàn)了其更穩(wěn)定的生成過程。其中乙酸乙酯、乙酸異戊酯還能賦予食醋蘋果、香蕉的香氣。這些酯類成分相互作用,能夠賦予食醋更濃郁的果香。
封閉式固態(tài)發(fā)酵的乙偶姻含量顯著高于傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵,發(fā)酵12 d即達(dá)到峰值(2 066.15 μg/100 mL),而傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵在發(fā)酵結(jié)束時(shí)乙偶姻質(zhì)量濃度為397.17 μg/100 mL。產(chǎn)生此差異的原因可能是夏季傳統(tǒng)發(fā)酵受溫度影響較大,酮類物質(zhì)的含量會(huì)隨著陳釀溫度的升高而降低,乙偶姻含量的增加也有助于增強(qiáng)食醋的奶油香氣。同時(shí),乙偶姻作為川芎嗪合成的前體物質(zhì),也能夠促進(jìn)川芎嗪大量合成。川芎嗪作為鎮(zhèn)江香醋中的生理活性物質(zhì),在食醋中表現(xiàn)出較高的抗氧化性和降血脂能力,具有治療心血管疾病的潛在功效,也是食醋的重要風(fēng)味物質(zhì)之一。
綜上所述,封閉式固態(tài)發(fā)酵的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),如乙酸乙酯、乙酸異戊酯、乙醇等,在早期達(dá)到較高濃度并迅速衰減,顯示出較短的高濃度積累期,且波動(dòng)性較大。揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的積累和衰減周期較短,更適用于快速生成并釋放風(fēng)味的發(fā)酵過程。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)變化則呈現(xiàn)出較長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定積累,部分風(fēng)味物質(zhì)如乙酸乙酯和乙酸異戊酯等的濃度保持較高水平,且下降較為平緩。保持了較為穩(wěn)定的風(fēng)味物質(zhì)生成,適合長(zhǎng)期的風(fēng)味積累和漸變發(fā)酵過程。這可能與發(fā)酵容器的通氣性、溫度控制等因素有關(guān)。這些差異可以通過調(diào)整發(fā)酵條件(如溫度、濕度、氣體交換等)進(jìn)一步優(yōu)化各自的發(fā)酵過程,以得到更符合需求的風(fēng)味物質(zhì)。
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6 固態(tài)釀造食醋感官評(píng)價(jià)的差異
采用電子舌評(píng)估鎮(zhèn)江香醋封閉和傳統(tǒng)發(fā)酵過程中18 個(gè)樣品的口味特征差異。如圖8所示,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,封閉式固態(tài)發(fā)酵的酸味和澀味逐漸增高,而苦味和咸味逐漸降低,其他味覺指標(biāo)沒有顯著差異;傳統(tǒng)發(fā)酵除酸味顯著增加外,其他味覺指標(biāo)略有降低。酸味的增強(qiáng)主要是由于發(fā)酵過程中產(chǎn)生了大量的有機(jī)酸,主要是醋酸。封閉式固態(tài)發(fā)酵中鮮味信號(hào)的增強(qiáng),主要是由于鮮味氨基酸(天冬氨酸和谷氨酸)的迅速積累,電子舌的結(jié)果也更好地印證了游離氨基酸和有機(jī)酸的變化趨勢(shì)。
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如圖9所示,封閉式固態(tài)發(fā)酵相比傳統(tǒng)發(fā)酵表現(xiàn)出更深的顏色,傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵表現(xiàn)出更高的渾濁度。在味覺指標(biāo)的感官評(píng)分中,可以看出封閉發(fā)酵的醋酸味和甜味強(qiáng)于傳統(tǒng)發(fā)酵,且封閉式固態(tài)發(fā)酵的食醋在口腔中風(fēng)味保持的時(shí)間更長(zhǎng)久。通過對(duì)香氣的感官評(píng)分分析發(fā)現(xiàn),傳統(tǒng)發(fā)酵表現(xiàn)出更濃郁的谷物香、炒米香和米醋香。
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結(jié)論
本研究對(duì)比分析了傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵與封閉式固態(tài)發(fā)酵兩種發(fā)酵體系的鎮(zhèn)江香醋在夏季生產(chǎn)條件下的風(fēng)味品質(zhì)差異。從發(fā)酵環(huán)境因子、理化指標(biāo)、生物活性物質(zhì)、揮發(fā)性和非揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)等多角度探討了兩種發(fā)酵體系的優(yōu)劣。封閉式固態(tài)發(fā)酵體系通過設(shè)備優(yōu)化實(shí)現(xiàn)溫濕度精準(zhǔn)控制,發(fā)酵效率高、溫度變化平穩(wěn);傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系受環(huán)境影響較大,溫度波動(dòng)顯著。封閉式固態(tài)發(fā)酵體系在發(fā)酵初期還原糖消耗快、不揮發(fā)酸生成速度快,酸度和非揮發(fā)酸比例更高,醋酸味顯著,風(fēng)味柔和。傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系的揮發(fā)性酸比例高,酸味明顯且風(fēng)味較復(fù)雜。封閉式固態(tài)發(fā)酵體系揮發(fā)性物質(zhì)種類和含量豐富,釋放高濃度香氣成分,口感綿柔;傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系揮發(fā)性物質(zhì)種類少但持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),有較強(qiáng)的谷物香和米醋香。生物活性物質(zhì)方面,封閉式固態(tài)發(fā)酵體系總酚和總黃酮含量在中期達(dá)到峰值但波動(dòng)較大;傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系表現(xiàn)穩(wěn)定,總黃酮峰值更高。兩種體系均含豐富的氨基酸,封閉式固態(tài)發(fā)酵體系鮮味氨基酸累積速率更快,苦味氨基酸含量的占比更低;傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系苦味成分比例偏高。感官評(píng)定顯示,封閉式固態(tài)發(fā)酵體系酸味和甜味突出、整體清爽;傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵體系風(fēng)味層次強(qiáng)、渾濁度大、谷物香更濃郁。封閉式固態(tài)發(fā)酵鎮(zhèn)江香醋在生產(chǎn)效率、風(fēng)味品質(zhì)穩(wěn)定性及酸味柔和性方面展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢(shì),而傳統(tǒng)發(fā)酵則在風(fēng)味復(fù)雜性和香氣濃郁度方面更為突出。封閉發(fā)酵體系可為鎮(zhèn)江香醋的高效穩(wěn)定生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)支持,但其微生物群落和風(fēng)味物質(zhì)的相關(guān)性機(jī)理有待進(jìn)一步研究,以實(shí)現(xiàn)風(fēng)味化合物的定向調(diào)控,提高鎮(zhèn)江香醋的品質(zhì)。
本文《傳統(tǒng)與封閉式固態(tài)食醋釀造體系風(fēng)味品質(zhì)的差異性分析》來源于《食品科學(xué)》2025年46卷第16期244-254頁(yè),作者:李思雨,余永建*,李滬強(qiáng),唐佳琦,張楠,朱圓圓,王玉芹,韓冬,王柯。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20241126-173。點(diǎn)擊下方 閱讀原文 即可查看文章相關(guān)信息。
實(shí)習(xí)編輯:王奕辰;責(zé)任編輯:張睿梅。點(diǎn)擊下方閱讀原文即可查看全文。圖片來源于文章原文及攝圖網(wǎng)
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